خالص سازی توکسین اپسیلون از سویه واکسینال کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ D با استفاده از کروماتوگرافی تبادل یون و ژل فیلتراسیون
Authors
Abstract:
باکتری کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ D در برهها، گوسالهها، کره اسبها، بچه خوکها و جوجهها باعث ایجاد بیماری انتروتوکسمی یا pulpy kidney می‌شود. همچنین در انسان، عامل بیماری enteritis necroticans می‌باشد. مهمترین توکسین تیپ D توکسین اپسیلون است. این توکسین به عنوان مهمترین فاکتور ویرولانس باکتری کلستریدیوم پر فرنژنس تیپ D در بیماریزایی به شمار میرود. در مطالعهی حاضر، عملیات خالصسازی توکسین اپسیلون با استفاده از تکنیک‌های مختلف کروماتوگرافی نظیر کروماتوگرافی تعویض کاتیون CM-Sepharose و ژل فیلتراسیون Sephadex-G100 با هدف ابداع روشی جدید و اقتصادی به منظور خالصسازی توکسین اپسیلون انجام شد. پس از کشت باکتریایی، MLD نمونه‌ی حاصل از کشت باعث مرگ موش‌ها تا رقت 8000/1 گردید. همچنین نمونه‌ی کشت اولیه باعث مرگ سلول‌های MDCK در کشت سلولی شد. بهترین غلظت نمک سولفات آمونیوم جهت ترسیب و تغلیظ نمونه‌ی کشت باکتریایی 60 درصد تعیین شد. پس از عملیات ترسیب، تغلیظ و دیالیز، نمونه‌ی خام روی کروماتوگرافی تعویض کاتیون CM-Sepharose بارگذاری شد. توکسین اپسیلون در غلظت نمک 100 میلی‌مولار خارج گردید. توکسین اپسیلون بر اساس فعالیت توکسین در مراحل مختلف خالصسازی حدود 9/138 برابر خالص شد. وزن مولکولی این توکسین حدود 34 کیلو دالتون تعیین گردید. با توجه به یافته‌های این تحقیق، روش‌های استفاده شده در عملیات خالصسازی این توکسین مناسب می‌باشد و توکسین به دست آمده دارای میزان فعالیت و درجه‌ی خلوص مناسبی است.
similar resources
خالص سازی توکسین اپسیلون از سویه واکسینال کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ d با استفاده از کروماتوگرافی تبادل یون و ژل فیلتراسیون
باکتری کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ d در برهها، گوسالهها، کره اسبها، بچه خوکها و جوجهها باعث ایجاد بیماری انتروتوکسمی یا pulpy kidney می شود. همچنین در انسان، عامل بیماری enteritis necroticans می باشد. مهمترین توکسین تیپ d توکسین اپسیلون است. این توکسین به عنوان مهمترین فاکتور ویرولانس باکتری کلستریدیوم پر فرنژنس تیپ d در بیماریزایی به شمار میرود. در مطالعهی حاضر، عملیات خالصسازی توک...
full textبررسی سمیت توکسین های آلفا (α) و اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D
سابقه و هدف: کلستریدیوم پرفرنجنس یکی از مهمترین گونه های بیماری زا در جنس کلستریدیوم است. توکسین های آلفا (α) و اپسیلون(ε) از توکسین های اصلی این باکتری به شمار می آید. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن های کد کننده و سمیت توکسین های کلستریدیوم پرفرنجنس تایپ D در دو محیط کشت پایه و محیط کشت پایه حاوی پودر جگر انجام شد. مواد و روش ها: در ابتدا سویه استاندارد بر روی محیط کشت های پایه که نیمی از آ...
full textبررسی سمیت توکسین های آلفا (α) و اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D
سابقه و هدف: کلستریدیوم پرفرنجنس یکی از مهمترین گونه های بیماری زا در جنس کلستریدیوم است. توکسین های آلفا (α) و اپسیلون(ε) از توکسین های اصلی این باکتری به شمار می آید. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن های کد کننده و سمیت توکسین های کلستریدیوم پرفرنجنس تایپ D در دو محیط کشت پایه و محیط کشت پایه حاوی پودر جگر انجام شد. مواد و روش ها: در ابتدا سویه استاندارد بر روی محیط کشت های پایه که نیمی از آ...
full textخالص سازی ایمونوگلوبولین Y از زرده تخم مرغ با روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون
سابقه و هدف: خالص سازی ایمونوگلوبولین Y از زرده تخم مرغ با روش های کروماتوگرافی از تحقیقات جدید می باشد و هدف این تحقیق نیز دستیابی به روش ساده و ارزان برای خالص سازی IgY از زرده تخم مرغ می باشد. مواد و روش ها: زرده تخم مرغ بعد از عبور از مش نایلونی در داخل استوانه مدرج جمع آوری شد. زرده با 10 برابر حجم HCL (برابر با 3mm) رقیق شده و سوسپانسیون سانتریفوژ گردید. سولفات آمونیوم تا 60% اشباع اضافه ...
full textبررسی بیان ژن etx توکسین اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D
مقدمه و هدف: جنس کلستریدیوم، بیش از80 گونه دارد. کلستریدیوم پرفرنجنس، یکی از بیشترین گونه های بیماریزا در جنس کلستریدیوم است که در صنعت دامداری خسارات زیادی ایجاد می کند. کلستریدیوم پرفرنجنس، توکسین های زیادی تولید می کند که توکسین اپسیلون(ε)، یکی از توکسین های اصلی آن است. در جدایه های تیپ Dی، توکسین اپسیلون عامل اصلی ایجاد کننده آنتروتوکسمی ای بسیار کشنده ًدر گوسفند و بز است. در این مطال...
full textبررسی فیوژن ژن اپسیلون- آلفا کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D و کلستریدیوم سپتیکوم به روش In silico
تکنولوژی DNA نوترکیب یک تکنیک مولکولی in vitro جهت جداسازی و دستکاری قطعات DNA می‌باشد. با استفاده از این تکنیک ساخت مولکول‌های کایمریک به نام مولکول DNA نوترکیب، سپس واردکردن این مولکول نوترکیب به سلول‌های زنده، همانندسازی و تکثیر آنها در سلول امکان پذیر شد. امروزه تکنولوژی فیوژن پروتئین یک استراتژی برای دسترسی سریع، ارزان و پربازده بیان پروتئین هاست. توالی نوکلئوتیدی ژن اپسیلون کلستریدیوم پرف...
full textMy Resources
Journal title
volume 11 issue 1
pages 92- 102
publication date 2015-03-01
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023